totsitlyred.com

Fout- in jel elektroforese

Gel elektroforese is een van die grootste metodes aangewend in molekulêre biologie vir die ontleding van DNA. Hierdie metode behels die migrasie van fragmente van DNA deur `n jel, waar hulle aan die hand van grootte of vorm van mekaar geskei. Maar selfs `n wetenskaplik verantwoordbare metode soos gel elektroforese is nie immuun teen foute.

Hoe Elektroforese Werke

  • Gel elektroforese behels die gebruik van `n gel gewoonlik gemaak van polimere soos agarose. Die gel is gedompel in `n bufferoplossing dat `n elektriese veld gelei. Die DNA monster van belang is eerste gefragmenteerde met behulp van restriksie-ensieme en word dan ingespuit word in die gel. Wanneer die elektriese veld is aangeskakel, die DNA-fragmente in die gel migreer na die positiewe elektrode. As die DNA-fragmente is van verskillende groottes, dan is die migrasie keer sal verskillend vir elke grootte fragment wees. Die fragmente word dan gevisualiseer met behulp van `n kleurstof of auto radiografie en is sigbaar as bands in die gel.

    DNA ontleed kan word met behulp van gel elektroforese.
    DNA ontleed kan word met behulp van gel elektroforese.

Besoedeling van die monster

  • Die groot toepassing van elektroforese is as `n instrument vir die ontleding van DNA in molekulêre biologie, maar dit word ook gebruik in forensiese as `n middel van die identifisering van die monsters van `n misdaadtoneel. Dit is belangrik dat bronne van foute in hierdie tegniek word tot die minimum beperk word om akkurate resultate te kry. Een bron van fout is besoedeling van die DNA monster. As daar vreemde DNA in die monster, sal die gel meer bands het as sou gevind word in `n jel wat net die gesuiwerde monster bevat.

    Micropipettes word dikwels gebruik om die monster in die gel spuit.
    Micropipettes word dikwels gebruik om die monster in die gel spuit.

Probleme met die Gel, Huidige en Buffer



  • Die konsentrasie van die gel moet ook korrek om foute te vermy. As die konsentrasie te hoog of te laag is, sal die fragmente óf te stadig of te vinnig migreer. Dit sal lei tot foute in die oplossing van die verskillende bands. Gedurende die elektroforese run, moet sorg gedra word om te verseker dat die spanning is bestendig. Enige skommelinge in die spanning tot gevolg sal hê in onvas migrasie van DNA-fragmente, wat lei tot foute in die lees van die bands. Die bufferoplossing moet ook van die korrekte samestelling wees, as `n buffer met die verkeerde pH of ioniese konsentrasie die vorm van die DNA-fragmente sal verander, ook die verandering van hul migrasie keer.

    A power-aanbod reguleerder word gebruik om die spanning in gel elektroforese bestendige hou.
    A power-aanbod reguleerder word gebruik om die spanning in gel elektroforese bestendige hou.

behoorlike Visualisering

  • Die belangrikste is, moet die gel behoorlik gevisualiseer. As die konsentrasie van die kleurstof of radioaktiewe ondersoek gebruik om die monsters te visualiseer te hoog is, sal die gevolglike beeld baie morsig wees, as oorblywende fragmente ook sal gevisualiseer. As die gel konsentrasie te laag is, sal daar geen visualisering wees. Wanneer die korrekte prosesse tydens al die fases gevolg is, sal gel elektroforese resultate wat akkuraat is en kan gebruik word met groot vertroue te lewer. Soos met al die wetenskaplike prosedures, kan gel elektroforese geneig om foute wees, maar dit kan tot die minimum beperk met `n goeie voorbereiding en hantering.

    Elke groep in die gevisualiseer gel verteenwoordig `n groep van DNA-fragmente van dieselfde grootte.
    Elke groep in die gevisualiseer gel verteenwoordig `n groep van DNA-fragmente van dieselfde grootte.
Deel op sosiale netwerke:

Verwante